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液相方法開發(fā)案例 | 根據(jù)樣品特性選擇檢測器和分離模式

更新時間:2023-07-19 點擊次數(shù):1134

液相色譜檢測方法的建立需要針對不同的樣品和分析目的,選用不同的分離模式和檢測器,充分發(fā)揮儀器性能,高效地達到分析目標。通常使用單一檢測器直接檢測可達到目標,必要時可衍生化后再檢測,或用多檢測器組合檢測。分離模式選擇與檢測器選擇的原則基本統(tǒng)一,即根據(jù)分析物結(jié)構(gòu)性質(zhì)初步判斷分離模式及流動相的選擇:根據(jù)分析物結(jié)構(gòu)性質(zhì)、分離模式、樣品處理方式、流動相的選擇等進行檢測器的配套選擇。分離模式和檢測器的選擇是色譜方法開發(fā)中不可分割的相互統(tǒng)一的重要環(huán)節(jié)。


關(guān)于分離模式和檢測器的選擇,

以下案例或可說明一二


01

脂肪族生物胺檢測分析

脂肪族生物胺樣品特性:此類物質(zhì)紫外可見光區(qū)吸收極弱,衍生化程序繁瑣效率低且易誤差損失,是水溶性的極性物質(zhì)。

方法開發(fā)思路:根據(jù)這些基本條件,我們判斷可以選擇HILIC模式,ELSD檢測器直接檢測。

檢測效果見下圖:

1.png

月旭Ultimate® HILIC Amphion II

對四種脂肪族生物胺的分離

微信截圖_20230719094015.png




02

甘油酯檢測分析

甘油酯樣品特性:此類物質(zhì)為脂溶性大,不溶于水或難溶于甲醇的非極性物質(zhì)。

方法開發(fā)思路:這樣的物質(zhì)適用非水反相色譜法,案例見<非水反相色譜法應(yīng)用案例及注意事項>。

03

氨基酸檢測

氨基酸樣品特性:部分紫外吸收弱,大極性和水溶性。

方法開發(fā)思路:可選擇衍生化法和非衍生化法。

兩種方法的分離效果見下圖:

2.png

月旭Ultimate® Amino Acid Plus

對23種氨基酸的非衍生法分離

3.png

月旭Ultimate® Amino Acid

對19種氨基酸的衍生化法分離




04

單糖寡糖類分析

單糖寡糖類樣品特性:水溶性的極性樣品,弱紫外可見吸收。

方法開發(fā)思路:這類物質(zhì)常選擇示差檢測器。

圖片

月旭Ultimate® XB-NH2 分析乳果糖

05

蛋白、RNA,病毒等樣品分析

蛋白、RNA,病毒等樣品特性:大分子。

方法開發(fā)思路:選擇體積排阻色譜法。

5.png

月旭Xtimate® SEC-120 分析RNA

7.png

月旭Xtimate® SEC-2000

分析去致病基因的痘病毒

8.png

月旭Xtimate® SEC-300 分析IgG蛋白

關(guān)于流動相的選擇,請延申閱讀<高效液相色譜中溶劑與檢測器的兼容性>。



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